βήματα εξαγωγής DNA με στήλη περιστροφής
Η εξαγωγή DNA με χρήση πυθμένα αντιπροσωπεύει μια επαναστατική μέθοδο στη μοριακή βιολογία, προσφέροντας μια ευρεία προσέγγιση για την απομόνωση υψηλής ποιότητας DNA από διάφορες βιολογικές δείγματα. Αυτή η διαδικασία περιλαμβάνει αρκετά κλειδιάκα βήματα, ξεκινώντας με την προετοιμασία δείγματος όπου τα κύτταρα λύνονται για να απελευθερώσουν το γενετικό τους υλικό. Το λυτό μεταφέρεται στη συνέχεια σε ένα ειδικό πυθμένα που περιέχει μια μνήμη από σιλίκιο. Στην παρουσία χαοτροπικών αλατιών, το DNA επιλεκτικά συνδέεται με αυτή τη μνήμη ενώ άλλα κυτταρικά συστατικά διασχίζουν. Το συνδεδεμένο DNA υποβάλλεται σε μια σειρά βαθμών πλύσιμου για να αφαιρεθούν ρύποι, χρησιμοποιώντας κεντριφυγή για να επιταχύνει τη διαδικασία. Τελικά, καθαρό DNA εκκρίνεται από τη μνήμη με τη χρήση ενός φυσικού εκκριτικού, τυπικά περιέχοντας λύσεις με χαμηλά αλάτια ή νερό. Αυτή η τεχνολογία χρησιμοποιεί την αρχή της εξαγωγής σε στερεό φάσμα, όπου η φιλία του DNA για το σιλίκιο υπό συγκεκριμένες χημικές συνθήκες επιτρέπει αποτελεσματική διαχωρισμό από άλλα κυτταρικά συστατικά. Η διαδικασία εφαρμόζεται ευρέως σε ερευνητικά εργαστήρια, διαγνωστικά κέντρα και εργαστήρια δικαστικής, προσφέροντας εφαρμογές από την προετοιμασία PCR έως τη γενετική ανάλυση. Η ακρίβεια και οιασιότητα της μεθόδου την κάνει ειδικά αξιόλογη για εφαρμογές μεταγενέστερης φάσης που απαιτούν υψηλής ποιότητας DNA, όπως η ακολουθία, η κλωνοποίηση και η γενετική δοκιμασία.