ວັດຖຸຂອງຂວດ HPLC ມີຜົນຕໍ່ຜົນການວິເຄາະແນວໃດ?

ປະກອບດ້ານວັດຖຸຂອງຂວດ HPLC ມີຜົນຕໍ່ຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງຂໍ້ມູນທີ່ໄດ້ຈາກການແຍກສ່ວນດ້ວຍຄອລ໌ມັນ (chromatographic data) ດ້ວຍການຄວບຄຸມການປະຕິສຳພັນຂອງສານທີ່ຕ້ອງການວິເຄາະ (analyte), ຄວາມສ່ຽງຕໍ່ການປົນເປືືອນ, ແລະ ຄວາມສະຖຽນທາງເຄມີໃນທັງໝົດຂອງຂະບວນການວິເຄາະ. ເມື່ອຫ້ອງທົດລອງມີຈຸດປະ່າງເພື່ອໃຫ້ໄດ້ຜົນການວັດແທກທີ່ສາມາດເຮັດຊ້ຳໄດ້ ແລະ ການຈຳແນກສານທີ່ມີປະລິມານນ້ອຍຢ່າງຖືກຕ້ອງ, ຄຸນສົມບັດທາງດ້ານຮ່າງກາຍ ແລະ ເຄມີຂອງວັດຖຸທີ່ໃຊ້ເຮັດຂວດຈະກາຍເປັນຈຸດຄວບຄຸມທີ່ສຳຄັນ ເຊິ່ງມີຜົນຕໍ່ຮູບຮ່າງຂອງສັນຍານ (peak shape), ອັດຕາການດຶງສານຄືນ (recovery rates), ແລະ ສຽງພື້ນຖານ (baseline noise). ການເຂົ້າໃຈວ່າປະເພດແກ້ວ, ສູດຂອງໂປລີເມີ (polymer formulations), ແລະ ການປິ່ນປົວເທື້ອຜິວ (surface treatments) ມີປະຕິສຳພັນກັບຕົວຢ່າງແນວໃດ ຈະຊ່ວຍໃຫ້ຜູ້ພັດທະນາວິທີການເລືອກຂວດທີ່ເໝາະສົມເພື່ອຮັກສາຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງສານທີ່ຕ້ອງການວິເຄາະ (analyte concentrations) ເລີ່ມຕົ້ນຈາກເວລາທີ່ເຕີມຕົວຢ່າງເຂົ້າໄປໃນຂວດ ຈົນເຖິງຂະບວນການການວັດແທກສຸດທ້າຍ, ເພື່ອໃຫ້ຜົນທີ່ວັດແທກໄດ້ສະທ້ອນເຖິງປະກອບທີ່ແທ້ຈິງຂອງຕົວຢ່າງ ແທນທີ່ຈະເປັນຜົນທີ່ເກີດຈາກພື້ນຜິວຂອງຂວດ.

ຂໍ້ຜິດພາດທີ່ເກີດຈາກວັດຖຸສະແດງອອກຜ່ານກົລະໄຫຼວຫຼາຍຢ່າງ ລວມທັງການດູດຊຶບທີ່ເກີດຂື້ນຕໍ່ພື້ນຜິວຂອງສານວິເຄາະທີ່ມີຂັ້ວຂັ້ວ (polar analytes) ຕໍ່ກຸ່ມ silanol, ການລ້າງອອກຂອງອາຍຸ (ions) ຫຼື ສານປັບຄວາມອ່ອນ (plasticizers) ເຂົ້າໄປໃນຕົວຢ່າງ, ແລະ ການເຈາະເຂົ້າໄປຂອງຄວາມຊື້ນ ຫຼື ຕົວທາລະລາຍທີ່ລະเหີຍນໄດ້ຜ່ານຜະ້າຂອງພັນທະສານ (polymer walls). ການປະຕິສຳພັນເຫຼົ່ານີ້ປ່ຽນແປງຄ່າຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ວັດແທກໄດ້ໃນຮູບແບບທີ່ຂະບວນການການປັບຄ່າມາດຕະຖານ (standard calibration procedures) ບໍ່ສາມາດຊົດເຊີຍໄດ້ຢ່າງເຕັມທີ່ ໂດຍເປີດເຜີຍເປັນພິເສດເມື່ອລະດັບຂອງສານວິເຄາະເຂົ້າໃກ້ກັບຂອບເຂດການກຳນົດ (detection limits) ຫຼື ເມື່ອຕົວຢ່າງຖືກເກັບຮັກສາໄວ້ກ່ອນການວິເຄາະ. ວິທະຍາສາດຄວບຄຸມຄຸນນະພາບຂອງອຸດສາຫະກຳຢາ, ສະຖານທີ່ທົດສອບສິ່ງແວດລ້ອມ, ແລະ ກຸ່ມຄົ້ນຄວ້າດ້ານຊີວະວິເຄາະ ໄດ້ບັນທຶກຄວາມປ່ຽນແປງທີ່ສຳຄັນໃນພາລາມິເຕີການທົດສອບວິທີການ (method validation parameters) ເມື່ອປ່ຽນຈາກວັດຖຸຂອງຂວດ (vial materials) ໄປໃຊ້ວັດຖຸອື່ນໂດຍບໍ່ມີການປັບຄືນຕາມລັກສະນະການປະຕິສຳພັນທີ່ແຕກຕ່າງກັນຂອງວັດຖຸແຕ່ລະຊະນິດ, ເຮັດໃຫ້ການເລືອກວັດຖຸເປັນສ່ວນສຳຄັນພື້ນຖານຂອງການພັດທະນາວິທີການທີ່ເຂັ້ມແຂງ ມີຄວາມໝາຍຫຼາຍກວ່າການຕັດສິນໃຈໃນການຊື້ຂາຍທີ່ເກີດຂື້ນຕາມຫຼັງ.

ປະເພດພື້ນຖານຂອງວັດຖຸ ແລະ ລັກສະນະເຄມີຂອງມັນ

ຄຸນສົມບັດຂອງແກ້ວ Borosilicate ປະເພດ I

ແກ້ວບໍໂຣຊິລິເຄດປະເພດ I ແມ່ນເປັນມາດຕະຖານທີ່ດີທີ່ສຸດສຳລັບການຜະລິດຂວດ HPLC ເນື່ອງຈາກຄຸນສົມບັດທີ່ດີເລີດໃນດ້ານຄວາມຕ້ານທານທາງເຄມີ ແລະ ມີການລະລາຍໄອອອນນ້ອຍທີ່ສຸດ. ວັດຖຸນີ້ປະກອບດ້ວຍຊີລິກາ (silica) ປະມານ 80 ເປີເຊັນ ຮ່ວມກັບບໍໂຣນໄຕຣອັກໄຊດ໌ (boron trioxide) ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ເກີດໂຄງສ້າງເຄືອຂ່າຍສາມມິຕິທີ່ຕ້ານການເຈາະເຂົ້າໂດຍນ້ຳ (hydrolytic attack) ໄດ້ຢ່າງດີເລີດ ເຖິງແມ່ນວ່າຈະຢູ່ໃນສະພາບການ pH ສູງຫຼືຕ່ຳຫຼາຍ ແລະ ອຸນຫະພູມທີ່ສູງ. ປະລິມານບໍໂຣນທີ່ມີຢູ່ຊ່ວຍຫຼຸດສ່ວນສຳປະສິດການຂະຫຍາຍຕົວຈາກຄວາມຮ້ອນ (coefficient of thermal expansion) ເມື່ອທຽບກັບແກ້ວຊອດາ-ລາຍ (soda-lime glass) ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ຂວດບໍໂຣຊິລິເຄດປະເພດ I ສາມາດຕ້ານການເຢັນແລະລະລາຍຊ້ຳໆກັນໄດ້ຫຼາຍຄັ້ງ ແລະ ປ່ຽນແປງອຸນຫະພູມຢ່າງໄວວ່າໃນຂະນະທີ່ກຳລັງກຽມຕົວຢ່າງ ໂດຍບໍ່ເກີດເປັນແຕກເປືອຍນ້ອຍ (microcracks) ທີ່ອາດຈະເຮັດໃຫ້ຄວາມສາມາດໃນການປິດຜາສົດ (seal integrity) ລົງ ຫຼື ນຳເອົາສິ່ງປົນເປືອນທີ່ເປັນເມັດ (particulate contamination) ເຂົ້າໄປໃນຕົວຢ່າງທີ່ນຳໄປວິເຄາະ.

ເຄມີສາທາລະນະຂອງໜ້າເປີດຂອງແກ້ວບໍໂຣຊິລິເຄດ ມີທັງຂໍ້ດີ ແລະ ຂໍ້ຈຳກັດສຳລັບການນຳໃຊ້ໃນດ້ານຄຣອມາໂຕກຣາຟີ. ກຸ່ມຊິລານອລ (silanol) ທີ່ມີຢູ່ຕາມທຳມະຊາດເທິງໜ້າເປີດຂອງແກ້ວສາມາດເຮັດໃຫ້ເກີດພັນທະບາງຢ່າງທີ່ເປັນພັນທະເຮີດໂຣເຈນກັບສານທີ່ມີຄວາມຂັ້ນຕົ້ນສູງ ເຊັ່ນ: ອາລ໌ກໍຮ໌ອລ໌, ອາມີນ, ແລະ ອາຊິດຄາບອກຊິລິກ, ສົ່ງຜົນໃຫ້ເກີດການດູດຊຶມທີ່ບໍ່ຕ້ອງການ ແລະ ລົດຕ່ຳລົງໃນອັດຕາການຟື້ນຟູສຳລັບການວັດແທກໃນລະດັບຕິດຕາມ. ແຕ່ວ່າເຄມີສາທາລະນະດຽວກັນນີ້ກໍໃຫ້ຄຸນສົມບັດການເປີດຮັບ (wetting) ທີ່ດີເລີດສຳລັບເຟສທີ່ເປັນນ້ຳ ແລະ ເຟສປະສົມທີ່ໃຊ້ເປັນເຟສທີ່ເຄື່ອນທີ່ (mobile phases), ເຮັດໃຫ້ການຖ່າຍໂອນຕົວຢ່າງຄົບຖ້ວນໃນລຳດັບການສົ່ງເຂົ້າອັດຕະໂນມັດ. ຄວາມເປັນດ່າງຂອງແກ້ວບໍໂຣຊິລິເຄດ ເຊິ່ງວັດແທກໄດ້ຈາກປະລິມານດ່າງທີ່ສາມາດສະກັດອອກໄດ້ (extractable alkali content), ຍັງຄົງຢູ່ໃຕ້ 0.1 milliequivalents per gram ຕາມຂໍ້ກຳນົດ USP Type I, ເຊິ່ງຊ່ວຍຫຼຸດຜ່ອນການປ່ຽນແປງ pH ໃນຕົວຢ່າງທີ່ມີບັຟເຟີ ແລະ ຫຼຸດຄວາມສ່ຽງຂອງການສຳລັບທີ່ເກີດຈາກນ້ຳ (hydrolytic degradation) ສຳລັບສານທີ່ອ່ອນໄຫວຕໍ່ຄວາມເປັນດ່າງ ຫຼື ຄວາມເປັນເປັກ (acid- or base-sensitive compounds) ໃນໄລຍະເກັບຮັກສາທີ່ຍາວນານ.

ການປິ່ນປົວໜ້າເປີດຂອງແກ້ວທີ່ຖືກເຮັດໃຫ້ບໍ່ມີປະສິດທິພາບ

ເຕັກໂນໂລຢີການປິດການໃຊ້ງານທີ່ເຮັດໃຫ້ເກີດຂື້ນທີ່ໜ້າພຽງຂອງແກ້ວບໍຣີຊິລິເຄດ ແກ້ໄຂຈຳນວນ silanol ທີ່ມີຢູ່ຕາມທຳມະຊາດ ໂດຍຜ່ານປະຕິກິລິຍາ silanization ຫຼື ຂະບວນການຫຸ້ມດ້ວຍ polymers ເພື່ອປ້ອງກັນສະຖານທີ່ທີ່ມີຄວາມເປັນປະຕິກິລິຍາຈາກການສຳຜັດໂດຍກົງກັບຕົວຢ່າງ. ໜ້າພຽງຂອງຂວດ HPLC ທີ່ຖືກ silanized ມີຊັ້ນ organosilane ທີ່ຖືກເຊື່ອມຕໍ່ດ້ວຍພາບເຄມີ (covalently bonded) ເຊິ່ງຈະແທນທີ່ proton acidic silanol ດ້ວຍຫົວຂໍ້ alkyl ຫຼື fluoroalkyl ທີ່ບໍ່ເຂົ້າກັນກັບນ້ຳ (hydrophobic) ເຊິ່ງຈະຫຼຸດຜ່ອນການດູດຊຶມຂອງສານທີ່ເປັນເບດ (basic compounds) ແລະ ປັບປຸງອັດຕາການດຶງກັບຄືນ (recovery rates) ສຳລັບສານເຄື່ອງຢາທີ່ມີຄຸນສົມບັດ amine. ການປິ່ນປົວເຫຼົ່ານີ້ເປັນທີ່ມີຄຸນຄ່າເປັນຢ່າງຍິ່ງສຳລັບວິທີການວິເຄາະທາງຊີວະພາບ (bioanalytical methods) ທີ່ໃຊ້ວັດແທກ peptides, proteins, ຫຼື nucleotides ໂດຍທີ່ການປະຕິກິລິຍາທີ່ໜ້າພຽງອາດເຮັດໃຫ້ສູນເສຍສັນຍານຂອງ analyte ທັງໝົດໃນລະດັບຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ 1 ນາໂກຣແກຼມຕໍ່ 1 ມິລີລິດ

ຄວາມໝັ້ນຄົງຂອງຊັ້ນທີ່ຖືກປິດການໃຊ້ງານແຕກຕ່າງກັນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ ຂຶ້ນກັບເຄມີທີ່ໃຊ້ໃນການປິ່ນປົວ ແລະ ເງື່ອນໄຂຂອງການປຸງແຕ່ງ. ການປິດການໃຊ້ງານດ້ວຍ trimethylsilyl ໃຫ້ຄວາມຮູ້ສຶກເປັນນ້ຳໄດ້ໃນລະດັບປານກາງ ເໝາະສຳລັບການນຳໃຊ້ທົ່ວໄປ ແຕ່ອາດຈະເສື່ອມສະພາບໄດ້ໃຕ້ເງື່ອນໄຂທີ່ເປັນດ່າງເຂັ້ມຂົ້ນຫຼາຍ ຫຼື ເມື່ອສຳຜັດກັບບັຟເຟີນ້ຳທີ່ມີຄ່າ pH ສູງເປັນເວລາດົນ. ຊັ້ນຫຸ້ມດ້ວຍ fluoropolymer ໃຫ້ຄວາມຕ້ານທານທາງເຄມີທີ່ດີເລີດທົ່ວທັງໝົດຂອງຂອບເຂດ pH ແລະ ຍັງຮັກສາປະສິດທິພາບໃນການປິດການໃຊ້ງານໄດ້ຈົນເຖິງຮ້ອຍຄັ້ງຂອງການສູບເຂົ້າ (injection cycles) ແຕ່ລາຄາທີ່ສູງຂຶ້ນຈຳກັດການນຳໃຊ້ໃນການນຳໃຊ້ທີ່ເປັນພິເສດເທົ່ານັ້ນ ເຊິ່ງຕ້ອງການຄວາມເປັນ inert ສູງສຸດ. ຫ້ອງທົດລອງຈຳເປັນຕ້ອງທົດສອບຄວາມປະສິດທິຜົນຂອງການປິດການໃຊ້ງານສຳລັບຄຳວິເຄາະທີ່ເປັນເລື່ອງເປັນພິເສດ ຜ່ານການສຶກສາການດຶງຄືນ (recovery studies) ໂດຍເປີຽບທຽບຂວາງທີ່ຖືກປິ່ນປົວ ແລະ ຂວາງທີ່ບໍ່ໄດ້ຖືກປິ່ນປົວ ເນື່ອງຈາກຄວາມປ່ຽນແປງໃນການຜະລິດ ແລະ ການເກົ່າຂອງເຄມີ ອາດຈະເຮັດໃຫ້ເກີດຄວາມແຕກຕ່າງລະຫວ່າງຊຸດຜະລິດ (batch-to-batch) ໃນຄຸນສົມບັດທີ່ເປັນໜ້າເນື້ອເທື່ອ ເຊິ່ງຈະສົ່ງຜົນຕໍ່ຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງວິທີການ.

Polypropylene ແລະ ວັດຖຸທີ່ເປັນທາງເລືອກອື່ນໆ

ການສ້າງຂອງຂວດ HPLC ທີ່ເຮັດຈາກ polypropylene ປ້ອງກັນບັນຫາການແຕກຫັກຂອງແກ້ວ ແລະ ຫຼຸດຜ່ອນໄອອອນອີນອກແອນທີ່ສາມາດສະກັດໄດ້, ເຮັດໃຫ້ມັນເປັນທີ່ນິຍົມໃຊ້ໃນການນຳໃຊ້ທີ່ຕ້ອງການຄວາມໝັ້ນຄົງທາງກົນ ແລະ ມີການປົນເປື້ອນພື້ນຖານຕ່ຳ ເຊິ່ງສຳຄັນກວ່າການພິຈາລະນາເຖິງຄວາມເຂົ້າກັນໄດ້ກັບຕົວທານ. ສ່ວນຫຼັງຂອງ hydrocarbon ທີ່ບໍ່ມີຂັ້ວຂອງ polypropylene ມີການປະຕິກິລິຍານ້ອຍທີ່ສຸດກັບ analyte ອິນຊານິກສ່ວນຫຼາຍ, ຈຶ່ງຫຼຸດຜ່ອນການສູນເສຍຈາກການດູດຊຶມສຳລັບສານທີ່ບໍ່ລະລາຍໃນນ້ຳ (hydrophobic compounds) ໃນຂະນະດຽວກັນກໍໃຫ້ການເປີດຮັບ (wetting) ທີ່ບໍ່ດີສຳລັບຕົວຢ່າງທີ່ເປັນນ້ຳຢ່າງເຕັມທີ່. ວັດສະດຸນີ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນຄວາມຕ້ານທາງດ້ານເຄມີທີ່ດີເລີດຕໍ່ ອັດຊິດ, ບາສ, ແລະ ວິທະຍາສາດທີ່ເປັນເກືອ ໃນໄລຍະອຸນຫະພູມທີ່ກວ້າງ, ເຮັດໃຫ້ເຫມາະສຳລັບຂະບວນການກຽມຕົວຢ່າງທີ່ຫຼາກຫຼາຍ ເຊັ່ນ: ການຍ່ອຍດ້ວຍເອນໄຊມ໌ (enzymatic digestion), ຂະບວນການການຕົກລະອອງ (precipitation workflows), ແລະ ການປັບ pH ໂດຍບໍ່ມີຄວາມສ່ຽງທີ່ຂວດຈະຖືກລະລາຍ ຫຼື ມີການອົບພະຍົບຂອງ plasticizer.

ຢ่างໃດກໍຕາມ, ວຽວແລະທີ່ເຮັດຈາກ polypropylene ມີຂໍ້ຈຳກັດທີ່ສຳຄັນທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບຄວາມປະທ້ານຕໍ່ຕົວເຮັດລະລາຍ ແລະ ຄວາມສະຖຽນຂອງຂະໜາດ ເຊິ່ງຈຳກັດການນຳໃຊ້ໃນບາງຂະບວນການຄຣອມາໂຕກຣາຟີ. ຕົວເຮັດລະລາຍອິນີເຄີ້ນທີ່ບໍ່ມີຂັ້ວເຊັ່ນ: hexane, chloroform, ແລະ tetrahydrofuran ຈະເຂົ້າໄປໃນຜະນັງຂອງວຽວແລະທີ່ເຮັດຈາກ polypropylene ຢ່າງຊ້າໆ, ສົ່ງຜົນໃຫ້ເກີດການສູນເສຍຈາກການລະເຫີຍນໃນໄລຍະເກັບຮັກສາທີ່ຍາວນານ ແລະ ອາດຈະເຮັດໃຫ້ສານທີ່ບໍ່ລະເຫີຍນໄດ້ເຂັ້ມຂຶ້ນໃນທາງທີ່ບໍ່ເປັນທຳມະຊາດ, ສົ່ງຜົນໃຫ້ຜົນໄດ້ຮັບການວັດແທກທີ່ສູງເກີນຈິງ. ອຸນຫະພູມທີ່ຈຸດເปลີ່ຍນຈາກສະຖານະເປັນແກ້ວ (glass transition temperature) ຂອງວັດສະດຸນີ້ທີ່ຢູ່ໃກ້ຄຽງ 0 ອົງສາເຊັນຕີເགຣດ ໝາຍຄວາມວ່າ ຕົວຢ່າງທີ່ເກັບໄວ້ໃນຕູ້ເຢັນອາດຈະເກີດການເปลີ່ຍນຮູບຮ່າງທາງຮ່າງກາຍຂອງຜະນັງວຽວ, ສົ່ງຜົນໃຫ້ການກົດຂອງ septum ບໍ່ດີ ແລະ ເກີດເປັນທາງທີ່ອາດຈະຮັ່ວຂອງສ່ວນປະກອບທີ່ລະເຫີຍນໄດ້. ຫ້ອງທົດລອງດ້ານການວິເຄາະຈຳເປັນຕ້ອງປະເມີນຢ່າງລະອຽດວ່າ ຂໍ້ດີຂອງ polypropylene ໃນການນຳໃຊ້ທີ່ເຈາະຈົງນັ້ນມີຄວາມເໝາະສົມຫຼາຍກວ່າຂໍ້ຈຳກັດທີ່ມີຢູ່ເປັນທຳມະຊາດຂອງມັນເທືອບໃນທຽບກັບທາງເລືອກທີ່ເຮັດຈາກແກ້ວ.

ກົລະໄຫຼວຂອງການຮີດສົ່ງຜົນຕໍ່ການວິເຄາະທີ່ເກີດຈາກວັດສະດຸ

ເສັ້ນທາງຂອງການສູນເສຍຈາກການດູດຊືມ

ການດູດຊຶມຂອງຕົວຢ່າງເຂົ້າໄປໃນພື້ນຜິວຂອງຂວດ HPLC ເກີດຂື້ນຜ່ານຫຼາຍຮູບແບບຂອງການປະສານງານ ທີ່ຂື້ນກັບທັງສະຖິລະພາບຂອງສຳລັບເຄມີ ແລະ ລັກສະນະຂອງວັດສະດຸທີ່ໃຊ້ເຮັດຂວດ. ການດຶງດູດດ້ວຍແຮງໄຟຟ້າລະຫວ່າງສຳລັບເຄມີທີ່ເປັນດ່າງ (basic compounds) ທີ່ຖືກປ່ຽນເປັນຮູບແບບທີ່ມີໂປໂຕນ ແລະ ຈຸດທີ່ມີຄວາມເປັນດ່າງເລັກນ້ອຍ (silanol sites) ທີ່ມີຄວາມເປັນລົບຢູ່ໃນພື້ນຜິວຂອງແກ້ວ ແມ່ນເປັນກົນໄກທີ່ເກີດຂື້ນບໍ່ຫຼາຍກ່ວາ່ ອື່ນ ແລະ ສ້າງໃຫ້ເກີດການສູນເສຍເປັນປະລິມານ (quantitative losses) ໂດຍສະເພາະຕໍ່ສຳລັບເຄມີທາງດ້ານຢາທີ່ປະກອບດ້ວຍກຸ່ມເອມີນທີ່ເປັນປະຖົມ, ອະນຸທີສາມ ຫຼື ອະນຸທີສີ່. ລະດັບຂອງການສູນເສຍຈາກການດູດຊຶມຈະເພີ່ມຂື້ນຢ່າງເປັນເລກຊີ້ກຳ (exponentially) ເມື່ອຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງຕົວຢ່າງຫຼຸດລົງ ເນື່ອງຈາກຈຸດທີ່ດູດຊຶມເຫຼົ່ານີ້ເປັນສ່ວນຫນຶ່ງທີ່ໃຫຍ່ຂື້ນຂອງຈຳນວນທັງໝົດຂອງໂມເລກຸນຕົວຢ່າງໃນລະດັບທີ່ຕ່ຳຫຼາຍ (trace levels) ເມື່ອທຽບກັບຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ສູງກວ່າ ໂດຍທີ່ໂມເລກຸນໃນເຟີສຂອງວິທະຍາສາດ (solution-phase molecules) ມີອິດທິພົວເລີດຫຼາຍກວ່າ.

ການປະຕິສຳພັນທີ່ກັນນ້ຳເປັນສາເຫດໃຫ້ເກີດການດູດຊຶມຂອງສານທີ່ບໍ່ມີຂັ້ວເຂົ້າໄປສູ່ເນື້ອເຄື່ອງແລະຜິວແກ້ວທີ່ຖືກປິ່ນປົວດ້ວຍສິລານ (silanized glass), ເຊິ່ງສ້າງຮູບແບບຄວາມເລືອກເອົາທີ່ແຕກຕ່າງຈາກວັດຖຸບໍລີໂຊລິເຄດ (borosilicate) ທີ່ບໍ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວ. ສານອາໂຣມາຕິກທີ່ມີຂະໜາດໃຫຍ່ ເຊັ່ນ: ຮາໂຣມອນສະເຕີຣອຍ, ວິຕາມິນທີ່ລະລາຍໃນເນື້ອເຄື່ອງ, ແລະ ຮາໂຣມອນສະເຕີຣອຍ ມີຄວາມເຂົ້າກັນໄດ້ສູງກັບເນື້ອເຄື່ອງທີ່ກັນນ້ຳ, ເຊິ່ງອາດຈະຫຼຸດຜ່ອນອັດຕາການດຶງເອົາ (recoveries) ຈາກຂວດເປັນພັນທະນິກ (polymer vials) ເຖິງແມ່ນວ່າຂວດເຫຼົ່ານີ້ຈະບໍ່ມີປະຕິສຳພັນຕໍ່ສານທີ່ມີຂັ້ວ. ອຸນຫະພູມມີຜົນຕໍ່ສະຖານະດຸນຂອງການດູດຊຶມ, ໂດຍອຸນຫະພູມທີ່ສູງຂຶ້ນເມື່ອເກັບຮັກສາຈະເຮັດໃຫ້ອັດຕາການປ່ອຍສານອອກ (desorption) ເພີ່ມຂຶ້ນ ແລະ ປັບປຸງອັດຕາການດຶງເອົາ, ແຕ່ຜົນປະໂຫຍດນີ້ຈະຕ້ອງຖືກຖ່ວງນ້ຳໜັກກັບຄວາມເປັນໄປໄດ້ທີ່ສານທີ່ອ່ອນໄຫວຕໍ່ອຸນຫະພູມຈະເສື່ອມສະພາບຈາກຄວາມຮ້ອນ. ຫ້ອງທົດລອງທີ່ກຳລັງພັດທະນາວິທີການສຳລັບສານທີ່ອ່ອນໄຫວຕໍ່ການສູນເສຍຈາກການດູດຊຶມຄວນດຳເນີນການສຶກສາຄວາມສະຖຽນຂອງສານຕາມເວລາ (time-course stability studies) ໂດຍປຽບທຽບຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງສານທີ່ວັດແທກທັນທີຫຼັງຈາກການເຕີມ ແລະ ການວັດແທກຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຫຼັງຈາກໄດ້ເກັບຮັກສາເປັນໄລຍະເວລາທີ່ສອດຄ່ອງກັບເວລາທີ່ໃຊ້ໃນຂະບວນການເຮັດວຽກຈິງ.

ມືອນທີ່ສາມາດລ້າງອອກໄດ້ ແລະ ມືອນທີ່ສາມາດສະກັດໄດ້

ມືອນທີ່ສາມາດລ້າງອອກໄດ້ຈາກວັດຖຸຂອງຂວດ HPLC ເຂົ້າໄປໃນຕົວຢ່າງທີ່ເປັນວິທີແກ້ວ ຈະເຮັດໃຫ້ເກີດສັນຍານທີ່ບໍ່ຕ້ອງການໃນຄຣອມາໂຕກຣາມ (chromatograms) ເຊິ່ງຈະເຮັດໃຫ້ການວິເຄາະສັນຍານ (peak integration) ຍາກຂຶ້ນ ແລະ ອາດຈະເກີດການອອກມາພ້ອມກັນ (co-elute) ກັບສານທີ່ຕ້ອງການວິເຄາະ (target analytes) ເຊິ່ງຈະເຮັດໃຫ້ຄວາມຖືກຕ້ອງໃນການວັດແທກປະລິມານ (quantification accuracy) ລົດຖອຍ. ຂວດແກ້ວຈະປ່ອຍອາຍຸອອກມາໃນປະລິມານນ້ອຍໆ ເຊັ່ນ: ອາຍຸຂອງ ສອດຽມ, ເປັກຊີເອີມ, ແຄລຊຽມ ແລະ ໂບຣອນ ຜ່ານການທຳລາຍເຄືອຂ່າຍຊິລິເຄດ (silicate network) ດ້ວຍນ້ຳ, ໂດຍອັດຕາການປ່ອຍອາຍຸອອກຈະເລີກຮູ້ວ່າໄວຂຶ້ນໃນສະພາບທີ່ເປັນດ່າງ (alkaline conditions) ແລະ ອຸນຫະພູມສູງ. ເຖິງແນວໃດກໍຕາມ, ປະກອບຂອງແກ້ວປະເພດ I (borosilicate) ຈະຫຼຸດຜ່ອນການປ່ອຍອາຍຸອອກເຫຼົ່ານີ້ໃຫ້ໜ້ອຍລົງເມື່ອທຽບກັບແກ້ວປະເພດ soda-lime, ແຕ່ການເກັບຮັກສາຕົວຢ່າງທີ່ເປັນນ້ຳທີ່ບໍ່ມີການປັບ pH (unbuffered aqueous samples) ໃນເວລາດົນນານກໍຍັງສາມາດເຮັດໃຫ້ເກີດການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງອາຍຸ (ionic strength) ແລະ ອາດຈະສົ່ງຜົນຕໍ່ເວລາທີ່ສານຈະອອກມາ (retention times) ສຳລັບສານທີ່ສາມາດປ່ຽນເປັນອາຍຸ (ionizable compounds) ໃນການແຍກແຍ້ງແບບ reversed-phase ຫຼື ion-exchange.

ຂວດທີ່ເຮັດຈາກພອລີເມີເຣື່ອງມີບັນຫາຄວາມສັບສົນໃນການສະກັດເອົາສານທີ່ອາດຈະປະກົດໄດ້ (extractable profiles) ມາກວ່າ, ລວມທັງມອນོເມີທີ່ຍັງບໍ່ໄດ້ເຂົ້າຮ່ວມໃນປະຕິກິລິຍາ, ຕົວເຄື່ອນເຮັດໃຫ້ເກີດປະຕິກິລິຍາ (polymerization catalysts), ຕົວຢືນຢັນທີ່ຕ້ານການເກີດອົກຊິເດຊັນ (antioxidant stabilizers), ແລະ oligomers ທີ່ມີນ້ຳໜັກໂມເລກຸນຕ່ຳ ທີ່ແບ່ງຕົວເຂົ້າໄປໃນຕົວເຮັດລະລາຍອິນີນ (organic solvents) ອີງຕາມຫຼັກການຄວາມເຂົ້າກັນໄດ້ຂອງຄວາມຂັ້ວ (polarity matching principles). ອາເຊໂຕນິໄຕຣລ (acetonitrile) ແລະ ເມທານອລ (methanol), ເຊິ່ງເປັນສ່ວນປະກອບທີ່ນິຍົມໃຊ້ໃນເຟສທີ່ເຄື່ອນທີ່ (mobile phases) ຂອງ HPLC, ສາມາດສະກັດເອົາສານເພີ່ມທີ່ມີຄວາມຂັ້ວສູງ (polar additives) ຈາກສູດທີ່ເຮັດຈາກ polypropylene ໄດ້ຢ່າງມີປະສິດທິຜົນ, ສ້າງຄວາມເປີດເຜີຍທີ່ບໍ່ປົກກະຕິໃນເສັ້ນຖານ (baseline disturbances) ແລະ ຈຸດເຮັດວຽກທີ່ບໍ່ມີຢູ່ຈິງ (ghost peaks) ທີ່ຮີ້ນຮາງການກວດພົບສານທີ່ອອກມາໃນເວລາທຳອິດ (early-eluting) ຫຼື ສານທີ່ມີປະລິມານນ້ອຍຫຼາຍ (trace-level analytes). ລະດັບຄວາມຮຸນແຮງຂອງມື້ນີ້ທີ່ເກີດຈາກສານທີ່ສາມາດສະກັດເອົາໄດ້ (extractable contamination) ມີຄວາມແຕກຕ່າງກັນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍລະຫວ່າງຜູ້ຜະລິດຕ່າງໆ ແລະ ເຖິງແມ່ນແຕ່ລະຫວ່າງຊຸດການຜະລິດ (production lots) ຈາກຜູ້ສະໜອງເດີມໆກັນ, ສະນັ້ນຈຶ່ງຈຳເປັນຕ້ອງມີການທົດສອບການຮັບຮອງຊຸດ (batch qualification testing) ສຳລັບການນຳໃຊ້ທີ່ມີຄວາມສຳຄັນ. ວິທະຍາສາດສະຖານ (Laboratories) ຄວນຈັດຕັ້ງຂະບວນການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບເຂົ້າ (incoming quality control procedures) ທີ່ລວມເຖິງການສົ່ງຕົວຢ່າງທີ່ບໍ່ມີສານ (blank injections) ຈາກຂວດທີ່ເປັນຕົວແທນກ່ອນຈະອະນຸຍາດໃຫ້ຊຸດໃໝ່ເຂົ້າໃຊ້ງານປົກກະຕິ, ໂດຍການກຳນົດເງື່ອນໄຂການຮັບຮອງ (acceptance criteria) ໂດຍອີງໃສ່ເກນເນື້ອທີ່ຂອງຈຸດເຮັດວຽກ (peak area thresholds) ໃນແຜ່ນການຄູ່ມືການສົ່ງຕົວຢ່າງທີ່ບໍ່ມີສານ (blank chromatograms).

ການເຮັດໃຫ້ເກີດການເສື່ອມສະພາບທາງເຄມີ

ວັດຖຸບາງຢ່າງທີ່ໃຊ້ເຮັດຂວາງ HPLC ສາມາດເປັນຕົວເຮັງໃຫ້ເກີດປະຕິກິລິຍາການສືບທອດທີ່ປ່ຽນແປງໂຄງສ້າງຂອງສານທີ່ຕ້ອງການວິເຄາະລະຫວ່າງການກະກຽມຕົວຢ່າງ ແລະ ການສູບເຂົ້າ, ສົ່ງຜົນໃຫ້ຄ່າການວັດແທກສານຕົ້ນຕໍຕ່ຳກວ່າຄວາມເປັນຈິງ ແລະ ເກີດສາຍສູນຍາການທີ່ບໍ່ຄວນມີຈາກຜະລິດຕະພັນທີ່ເສື່ອມສະພາບ. ຄວາມເປັນດ່າງທີ່ເຫຼືອຢູ່ເທິງເນື້ອເຄື່ອງແຈ້ວສົ່ງເສີມການຮ່າງຕົວຂອງເອສເຕີ, ການແຕກຕົວຂອງເອມາຍ, ແລະ ປະຕິກິລິຍາການເກີດອົກຊີເດຊັນ, ໂດຍເປັນພິເສດກັບຕົວຢ່າງທີ່ເກັບໄວ້ໃນສະພາບ pH ທີ່ເປັນກາງຈົນເຖິງດ່າງ ເຊິ່ງຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງອີອົນ hydroxide ຈະເພີ່ມຄວາມເປັນ nucleophilicity ຂອງໂມເລກຸນນ້ຳ. ການສຶກສາຄວາມສະຖຽນຂອງຢາເຄື່ອງມືມັກຈະສັງເກດເຫັນການເສື່ອມສະພາບທີ່ເລີ່ມຕົ້ນໄວ້ຂຶ້ນໃນຂວາງເຄື່ອງແຈ້ວ ເມື່ອທຽບກັບຂວາງທີ່ເຮັດຈາກພັນທະສານທີ່ບໍ່ເກີດປະຕິກິລິຍາ ສຳລັບສານທີ່ມີການເຊື່ອມຕໍ່ເອສເຕີ, ເຊິ່ງເນັ້ນໃຫ້ເຫັນຄວາມສຳຄັນຂອງການເລືອກວັດຖຸໃນການສຶກສາການເສື່ອມສະພາບທີ່ບັງຄັບ ແລະ ໂຄງການຄວາມສະຖຽນໃນໄລຍະຍາວ.

ການມົນລະພິດໂລຫະຈາກຂະບວນການຜະລິດສາມາດກະຕຸ້ນເສັ້ນທາງການລະລາຍ oxidative ເຖິງແມ່ນວ່າຈະມີຢູ່ໃນລະດັບຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສ່ວນໃນແຕ່ລະພັນລ້ານ. ion ເຫຼັກ, ທອງແດງ, ແລະ chromium leached ຈາກອຸປະກອນການຜະລິດເຫຼັກສະແຕນເລດຫຼືມີຢູ່ໃນເປັນ impurities ໃນວັດສະດຸແກ້ວດິບເຂົ້າຮ່ວມໃນການປະຕິກິລິຍາປະເພດ Fenton ທີ່ສ້າງພັນສານອົກຊີເຈນ reactive, ນໍາໄປສູ່ການວິເຄາະ oxidation ສໍາລັບສານປະສົມທີ່ມີ ປິດ ຫວຍ hplc ພື້ນຜິວຫຼຸດຜ່ອນກິດຈະ ກໍາ catalytic ໂດຍການປົກປ້ອງໂລຫະທີ່ປົນເປື້ອນຈາກການ ສໍາ ຜັດກັບແຫຼວ, ເຖິງແມ່ນວ່າໂລຫະທີ່ມີລັກສະນະທີ່ລວມເຂົ້າໃນໂຄງສ້າງເຄືອຂ່າຍແກ້ວຍັງສາມາດມີຜົນກະທົບ catalytic. ໂຄດໂກລການຢັ້ງຢືນວິທີການຄວນປະກອບດ້ວຍການທົດລອງການລະລາຍແບບບັງຄັບໃຊ້ການປຽບທຽບຜົນຈາກວັດສະດຸ flacon ທີ່ແຕກຕ່າງກັນເພື່ອລະບຸວ່າການເລືອກຂອງຖັງມີອິດທິພົນຕໍ່ໂປຣໄຟລ degradation ແລະ kinetics ທີ່ສັງເກດເຫັນຫຼືບໍ່.

ຍຸດທະສາດການເລືອກວັດສະດຸ ສໍາ ລັບສະຖານະການການວິເຄາະທີ່ແຕກຕ່າງກັນ

ການຈັບຄູ່ຄຸນສົມບັດຂອງວັດຖຸເຂົ້າກັບລັກສະນະຂອງຕົວຢ່າງ

ການເລືອກວັດຖຸຂອງຂວດ HPLC ທີ່ເໝາະສົມທີ່ສຸດເລີ່ມຕົ້ນດ້ວຍການປະເມີນຜົນຢ່າງເປັນລະບົບຕໍ່ປະກອບຂອງຕົວຢ່າງ ເຊິ່ງລວມເຖິງ pH, ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງໄອອົງ, ປະລິມານຂອງຕົວແທນອິນິນທີ່ເປັນອິນິນ, ແລະ ການມີຢູ່ຂອງສານທີ່ມີຄວາມເປັນປະຕິກິລິຍາ ທີ່ອາດຈະປະຕິກິລິຍາກັບພື້ນຜິວຂອງຂວດ. ຕົວຢ່າງທີ່ເປັນນ້ຳທີ່ມີຊີວະພາບ ເຊິ່ງປະກອບດ້ວຍໂປຼຕີນ, ຟອສໂຟລິບິດ, ແລະ ເມທາບໍລິດ ມັກຈະໃຫ້ຜົນດີໃນຂວດແກ້ວບໍລີຊິລິເຄດປະເພດ I, ເນື່ອງຈາກພື້ນຜິວແກ້ວທີ່ມີຄຸນສົມບັດດຶງດູດນ້ຳຈະຊ່ວຍໃຫ້ນ້ຳທີ່ເປັນຕົວຢ່າງແຜ່ຢ້າງທັ້ງໝົດ ແລະ ຫຼຸດຜ່ອນການຄົງເຫຼືອຂອງດົມນ້ຳໃນສ່ວນຂ້າງຂອງຂວດໃນເວລາເກັບຕົວຢ່າງດ້ວຍລະບົບອັດຕະໂນມັດ. ຄວາມສາມາດໃນການປົກປ້ອງ pH ຂອງຂະບວນການທີ່ເປັນຊີວະພາບຊ່ວຍເປັນການເປີດເຜີຍຄວາມເປັນດ່າງທີ່ເກີດຈາກພື້ນຜິວ ເຊິ່ງຈະຫຼຸດຜ່ອນຄວາມກັງວົນຕໍ່ການເສື່ອມສະພາບທີ່ຂຶ້ນກັບ pH ແລະ ສາມາດຮັກສາອັດຕາການດຶງເອົາ (recovery) ໃຫ້ຢູ່ໃນເກນທີ່ຍອມຮັບໄດ້ ສຳລັບສານວິເຄາະທີ່ເປັນຢາ ແລະ ສານຊີວະທີ່ເກີດຂື້ນໃນຮ່າງກາຍ.

ຕົວຢ່າງທີ່ມີເນື້ອໃນອິນຊີເລີ້ມສູງ ລວມທັງການສະກັດສິ່ງແວດລ້ອມທີ່ຖືກລະລາຍໃນ hexane ຫຼື dichloromethane ຕ້ອງໄດ້ຮັບການປະເມີນຢ່າງລະມັດລະວັງ ເນື່ອງຈາກຕົວທານອິນຊີເລີ້ມອາດຈະສະກັດພາສະຕິກໄຊເຊີ້ນອອກຈາກຂວດພັດທະນາທີ່ເຮັດຈາກໂປລີເມີ ໃນເວລາດຽວກັນກັບທີ່ບໍ່ສາມາດເຮັດໃຫ້ເຄື່ອງແຊ່ນ້ຳໃນເຄື່ອງແຊ່ນ້ຳທີ່ເຮັດຈາກແກ້ວໄດ້ຢ່າງມີປະສິດທິຜົນ. ຂວດແກ້ວທີ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍ silanized ແມ່ນເປັນທາງເລືອກທີ່ເໝາະສົມ ເຊິ່ງໃຫ້ຄວາມສາມາດໃນການເຮັດໃຫ້ເຄື່ອງແຊ່ນ້ຳໄດ້ດີພໍຜ່ານພະລັງງານທີ່ເຫຼືອຢູ່ທີ່ເທື້ອຜິວ ແລະ ຫຼຸດຜ່ອນການປົນເປື້ອນທີ່ສາມາດສະກັດໄດ້ໃນລະດັບຕ່ຳ ເມື່ອທຽບກັບທາງເລືອກທີ່ເຮັດຈາກໂປລີເມີ. ສຳລັບຕົວຢ່າງທີ່ມີເປັກ (pH) ຢູ່ໃນລະດັບສູງຫຼືຕ່ຳຫຼາຍ ເຊິ່ງເກີດຈາກການມີກົດທີ່ເຂັ້ມຂົ້ນຫຼືເບດທີ່ເຂັ້ມຂົ້ນ ນອກເໜືອຈາກຂອບເຂດການປົກປ້ອງຂອງລະບົບຊີວະພາບທົ່ວໄປ ວັດສະດຸທີ່ເປັນພິເສດເຊັ່ນ: ແກ້ວທີ່ຖືກຫຸ້ມດ້ວຍ fluoropolymer ຫຼື polypropylene ທີ່ມີຄວາມບໍລິສຸດສູງອາດຈະຈຳເປັນເພື່ອປ້ອງກັນການລະລາຍຂອງຂວດ ຫຼື ການລະບາຍຂອງໄອອອນໃນລະດັບທີ່ສູງເກີນໄປ ເຊິ່ງອາດຈະຮີ້ນຮາງຕໍ່ການແຍກຕົວດ້ວຍວິທີ chromatographic ຫຼື ລະບົບການກວດພົບ.

ການຈັດການກັບບັນຫາການວັດແທກໃນລະດັບທີ່ຕ່ຳຫຼາຍ

ການນຳໃຊ້ວິທີການວິເຄາະຕາມລຳດັບເພື່ອຕິດຕາມ (Trace analysis) ທີ່ຕ້ອງການຂອບເຂດການປະລິມານ (limits of quantification) ຕ່ຳກວ່າໜຶ່ງນາໂນກຣາມຕໍ່ມິລີລິດເຕີ ເຮັດໃຫ້ມີຄວາມຕ້ອງການທີ່ເຂັ້ມງວດຕໍ່ຄວາມເປັນເນື້ອທີ່ບໍ່ເຮັດປະຕິກິລິຍາ (inertness) ຂອງວັດຖຸທີ່ໃຊ້ເຮັດຂວດ HPLC; ເນື່ອງຈາກການສູນເສຍທີ່ເກີດຈາກການດູດຊືມ (adsorptive losses) ແມ່ນເກີດຂື້ນໄດ້ເຖິງແມ່ນຈະຢູ່ໃນປະລິມານທີ່ນ້ອຍທີ່ສຸດ ແລະ ສາມາດນຳໄປສູ່ຄວາມບໍ່ຖືກຕ້ອງ (imprecision) ແລະ ຄວາມເບື່ອງເບື້ນ (bias) ທີ່ບໍ່ອາດຮັບໄດ້ໃນລະດັບຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນດັ່ງກ່າວ. ວິທີການທາງຊີວະວິເຄາະ (Bioanalytical methods) ທີ່ໃຊ້ວັດແທກປະລິມານຂອງອົງປະກອບທາງທໍາມະຊາດ (therapeutic antibodies), ໂປເຕີນເປັບໄຕດ໌ (peptide hormones), ຫຼື ສະເຕີຣ໌ຣອຍດ໌ທີ່ມີຢູ່ຕາມທຳມະຊາດ (endogenous steroids) ໃນເລືອດ (plasma) ໂດຍທົ່ວໄປຈະຕ້ອງການຂວດແກ້ວທີ່ຖືກເຮັດໃຫ້ບໍ່ເຮັດປະຕິກິລິຍາ (deactivated glass vials) ທີ່ມີການປິ່ນປົວເທື້ອຜິວທີ່ຖືກຢືນຢັນວ່າມີການດູດຊືມຕ່ຳ (validated low-adsorption surface treatments) ເພື່ອບັນລຸອັດຕາການຟື້ນຟູ (recovery) ທີ່ເໝາະສົມທົ່ວທັງຂອບເຂດການປັບຄ່າ (calibration range). ການສຶກສາອັດຕາການຟື້ນຟູ (Recovery studies) ທີ່ປຽບທຽບຕົວຢ່າງທີ່ເຮັດຂື້ນໃໝ່ກັບຕົວຢ່າງທີ່ເກັບໄວ້ໃນຂວດເປັນເວລາທີ່ເທົ່າກັບເວລາທີ່ໃຊ້ໃນຂະບວນການເຮັດວຽກຈິງ (actual workflow duration) ຈະໃຫ້ຂໍ້ມູນການຢືນຢັນທີ່ສຳຄັນ, ໂດຍເງື່ອນໄຂການຮັບຮອງ (acceptance criteria) ໂດຍທົ່ວໄປຈະຕ້ອງການອັດຕາການຟື້ນຟູ (recoveries) ສູງກວ່າ 85 ເປີເຊັນ ໃນຂອບເຂດຕ່ຳສຸດຂອງການປະລິມານ (lower limit of quantification).

ວິທີການຫຼາຍສ່ວນປະກອບທີ່ວິເຄາະໂຄງສ້າງທີ່ແຕກຕ່າງກັນຂອງສານທີ່ຕ້ອງການວິເຄາະພາຍໃນການເດີນຜ່ານຄອລ໌ມີທີ່ດຽວ ເປັນເລື່ອງທີ່ທ້າທາຍເປັນພິເສດໃນການເລືອກວັດຖຸເນື່ອງຈາກວ່າສານທີ່ມີຄວາມຂັ້ນຕອນທາງໄຟຟາ (polarity) ແລະ ກຸ່ມທີ່ເຮັດວຽກ (functional groups) ທີ່ແຕກຕ່າງກັນຈະມີຮູບແບບການປະຕິສຳພັນທີ່ແຕກຕ່າງກັນກັບເຄື່ອງໝາກທີ່ໃຊ້. ວຽນທີ່ເຮັດຈາກບໍໂຣຊິລິເຄດທີ່ບໍ່ໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວອາດຈະໃຫ້ອັດຕາການຟື້ນຟູທີ່ດີເລີດສຳລັບສານທີ່ເປັນກາງ ຫຼື ສານທີ່ເປັນອາຊິດ ແຕ່ໃນເວລາດຽວກັນນີ້ກໍອາດຈະເກີດການສູນເສຍຢ່າງຮຸນແຮງຕໍ່ສານທີ່ເປັນເບດ (basic analytes) ເຊິ່ງຈຳເປັນຕ້ອງມີການປິ່ນປົວເຄື່ອງໝາກເພື່ອບັນລຸຜົນການປະຕິບັດທີ່ຍອມຮັບໄດ້ສຳລັບສານທັງໝົດທີ່ຕ້ອງການວິເຄາະ. ອີກທາງໜຶ່ງ, ຜູ້ພັດທະນາວິທີການອາດຈະເລືອກໃຊ້ວຽນທີ່ເຮັດຈາກພັລີເມີ (polymer vials) ເມື່ອສານທີ່ຕ້ອງການວິເຄາະສ່ວນຫຼາຍເປັນສານທີ່ບໍ່ມີຂັ້ນຕອນທາງໄຟຟາ (nonpolar compounds) ແລະ ມີແນວໂນ້ມທີ່ຈະຖືກດູດຊືມແບບ hydrophobic ໃນເຄື່ອງໝາກທີ່ໄດ້ຮັບການ silanized ໂດຍຍອມຮັບການແ Rang ຂອງຄວາມເປັນໄປໄດ້ທີ່ຕົວເຮືອນທີ່ໃຊ້ຈະເກີດການລົ້ນໄຫຼຂອງຕົວທີ່ລະລາຍ (solvent permeability). ການປະເມີນຜົນການຟື້ນຟູຢ່າງເຕັມຮູບແບບ ສຳລັບສານທັງໝົດທີ່ຕ້ອງການວິເຄາະ ໃນເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາທີ່ເປັນຈິງ ຍັງຄົງເປັນສິ່ງຈຳເປັນເພື່ອຢືນຢັນຄວາມເຂົ້າກັນໄດ້ຂອງວັດຖຸ ບໍ່ວ່າຈະເປັນການທຳนายທາງທິດສະດີທີ່ອີງໃສ່ຄວາມສຳພັນລະຫວ່າງໂຄງສ້າງ-ກິດຈະກຳ (structure-activity relationships).

ການດຸລະນະລະຫວ່າງການພິຈາລະນາຄ່າໃຊ້ຈ່າຍ ແລະ ຄວາມຕ້ອງການດ້ານປະສິດທິພາບ

ປັດໄຈດ້ານເສດຖະກິດມີອິດທິພົວຕໍ່ການμືອງເລືອກວັດຖຸຂອງຂວດ HPLC ໂດຍສະເພາະໃນຫ້ອງທົດລອງທີ່ມີປະສິດທິພາບສູງ ເຊິ່ງປຸງແຕ່ງຕົວຢ່າງຈຳນວນຫຼາຍຫຼາຍຄັ້ງຕໍ່ເດືອນ (ຫຼາຍພັນຕົວຢ່າງ) ໂດຍທີ່ຄ່າໃຊ້ຈ່າຍຕໍ່ຕົວຢ່າງແຕ່ລະຊິ້ນຈະສົ່ງຜົນໂດຍກົງຕໍ່ງົບປະມານດ້ານການດຳເນີນງານ. ຂວດບໍລິສຸດທິ່ງປະເພດ I ທີ່ເຮັດຈາກແກ້ວບໍລິສິເຄດ (borosilicate) ໂດຍບໍ່ມີການປັບປຸງເທື່ອງໜ້າເປັນທາງເລືອກທີ່ຖືກທີ່ສຸດ ເໝາະສຳລັບການທົດສອບຄຸນນະພາບຢາທີ່ເຮັດຢ່າງປົກກະຕິ ສຳລັບສານທີ່ມີຄວາມເສຖຽນຢູ່ໃນຊ່ວງຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນກາງ ໂດຍທີ່ການສູນເສຍຈາກການດູດຊຶມ (adsorptive losses) ຍັງບໍ່ມີນ້ຳໜັກ. ຂວດເຫຼົ່ານີ້ໃຫ້ປະສິດທິພາບທີ່ເໝາະສົມສຳລັບການທົດສອບການລະລາຍ (dissolution testing), ການວິເຄາະຄວາມເປັນເອກະພາບຂອງເນື້ອໃນ (content uniformity analysis), ແລະ ການວິເຄາະລັກສະນະສິ່ງປົນເປື້ອນ (impurity profiling) ໂດຍທີ່ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງສານທີ່ຕ້ອງການມັກຈະເກີນກວ່າໆ 1 ມິກໂຣກຣາມຕໍ່ມິລິລິດ (μg/mL) ແລະ ຕົວຢ່າງຈະຖືກວິເຄາະພາຍໃນບໍ່ເກີນຊົ່ວໂມງຫຼັງຈາກການເຕີມເຕັມ.

ວັດຖຸສະເພາະທາງດ້ານເຕັກນິກ ລວມທັງແກ້ວທີ່ຖືກປິດການໃຊ້ງານແລ້ວ ແລະ ວັດຖຸທີ່ເປັນທາງເລືອກຈາກພოລີເມີຣ໌ ມີລາຄາສູງກວ່າ ເຊິ່ງອາດຈະເຮັດໃຫ້ຕົ້ນທຶນຕໍ່ຕົວຢ່າງເພີ່ມຂຶ້ນ 2–10 ເທົ່າ ເມື່ອທຽບກັບຂວດແກ້ວບໍໂຣຊິລິເຄດທີ່ມາດຕະຖານ. ຫ້ອງທົດລອງຈະຕ້ອງໃຫ້ເຫດຜົນທີ່ຊັດເຈນຕໍ່ການໃຊ້ຈ່າຍເຫຼົ່ານີ້ ຜ່ານການບັນທຶກການປັບປຸງດ້ານການປະຕິບັດ ເຊັ່ນ: ການດຶງເອົາສານທີ່ດີຂຶ້ນ, ຄວາມແຕກຕ່າງທີ່ຫຼຸດລົງ, ຫຼື ຄວາມສະຖຽນຂອງຕົວຢ່າງທີ່ຍາວນານຂຶ້ນ ເຊິ່ງສອດຄ່ອງກັບເງື່ອນໄຂການຮັບຮອງຂອງການທົດສອບວິທີການ ຫຼື ຂໍ້ກຳນົດດ້ານການຄຸມຄອງ. ການວິເຄາະປຽບທຽບຕົ້ນທຶນ-ປະໂຫຍດຄວນຄຳນຶງເຖິງຄ່າໃຊ້ຈ່າຍທີ່ເກີດຂຶ້ນຢ່າງເງົຽບໆ ເຊັ່ນ: ການທົດລອງລົ້ມເຫຼວ, ການວິເຄາະຕົວຢ່າງໃໝ່, ແລະ ການແກ້ໄຂບັນຫາຂອງວິທີການເມື່ອໃຊ້ວັດຖຸທີ່ບໍ່ເໝາະສົມ ເນື່ອງຈາກປັດໄຈເຫຼົ່ານີ້ມັກຈະເກີນກວ່າຄ່າໃຊ້ຈ່າຍເພີ່ມເຕີມຂອງຂວດທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງ. ການເລືອກວັດຖຸຢ່າງມີຢຸດທະສາດ ໂດຍອີງໃສ່ຄວາມຕ້ອງການເພື່ອການນຳໃຊ້ເฉະເພາະ ແທນທີ່ຈະຊື້ຂວດປະເພດດຽວໆທັງໝົດ ຈະຊ່ວຍໃຫ້ຫ້ອງທົດລອງສາມາດເພີ່ມປະສິດທິພາບການດຳເນີນງານໂດຍລວມ ໃນຂະນະທີ່ຮັກສາມາດຕະຖານຄຸນນະພາບທີ່ເໝາະສົມໄວ້ໃນທຸກໆການວິເຄາະທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.

ເລື່ອງທີ່ຕ້ອງພິຈາລະນາດ້ານການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບ ແລະ ການຢືນຢັນ

ຂະບວນການຢືນຢັນຄຸນນະພາບວັດຖຸດິບທີ່ເຂົ້າມາ

ໂປຣແກຣມຮັບປະກັນຄຸນນະພາບທີ່ເຂັ້ມແຂງຕ້ອງມີການກວດສອບ ແລະ ການທົດສອບການຢືນຢັນວັດຖຸດິບທີ່ເຂົ້າມາ ສຳລັບຊຸດຂວດ HPLC ກ່ອນຈະອະນຸຍາດໃຫ້ນຳໃຊ້ໃນວິທີການວິເຄາະທີ່ໄດ້ຮັບການຢືນຢັນແລ້ວ. ການກວດສອບດ້ວຍຕາເປີດເຜີຍຂໍ້ບົກບ່ອນທີ່ເຫັນໄດ້ຊັດເຈນ ເຊັ່ນ: ການແຕກ, ຮ້ອຍ, ຫຼື ຂໍ້ບົກບ່ອນໃນຂະບວນການຂຶ້ນຮູບ ທີ່ອາດຈະສົ່ງຜົນຕໍ່ຄວາມສາມາດໃນການປິດຜົນຢ່າງເຕັມທີ່ ຫຼື ກໍ່ໃຫ້ເກີດມືອນທີ່ເປັນອັນຕະລາຍຕໍ່ຄຸນນະພາບຕົວຢ່າງ; ມາດຕະຖານການຮັບເອົາມັກຈະປະຕິເສດຊຸດທີ່ມີອັດຕາຂໍ້ບົກບ່ອນເກີນຈຳນວນທີ່ກຳນົດໄວ້. ການກວດສອບມິຕິຈະຮັບປະກັນວ່າເສັ້ນຜ່າສູນກາງ, ຄວາມສູງ, ແລະ ຮູບຮ່າງຂອງສ່ວນຄໍຂອງຂວດຢູ່ໃນຂອບເຂດທີ່ກຳນົດໄວ້ເພື່ອໃຫ້ເຂົ້າກັນໄດ້ກັບອຸປະກອນ autosampler, ເພື່ອປ້ອງກັນບັນຫາດ້ານກົນຈັກໃນເວລາທີ່ເຄື່ອງເຮັດວຽກໂດຍບໍ່ມີບຸກຄົນຄຸມຄວບຄຸມ ເຊິ່ງອາດຈະເຮັດໃຫ້ເຄື່ອງມືທີ່ມີລາຄາແພງເສຍຫາຍ ຫຼື ສົ່ງຜົນຕໍ່ຄຸນນະພາບຂອງຕົວຢ່າງ.

ການທົດສອບຄວາມເໝາະສົມດ້ານເຄມີ ແມ່ນປະເມີນຄຸນລັກສະນະການປະຕິບັດທີ່ສຳຄັນ ລວມທັງ ລະດັບຂອງສານທີ່ສາມາດສະກັດໄດ້ (extractable contamination), ຜົນກະທົບຕໍ່ຄ່າ pH ຂອງວິທີການທີ່ມີບັຟເຟີ (buffered solutions), ແລະ ອັດຕາການຟື້ນຟູຂອງສານທີ່ຖືກວິເຄາະ (analytes) ທີ່ເປັນຕົວແທນ ແລະ ມີແນວໂນ້ມຈະສູນເສຍໄປຈາກການດູດຊຶມ (adsorptive loss). ວິທີການສົ່ງຕົວຢ່າງເปล່າ (Blank injection protocols) ປະກອບດ້ວຍການເຕີມຂວດທີ່ໃຊ້ທົດສອບດ້ວຍຕົວເຮັດລະລາຍທີ່ບໍ່ປົນເປືືອນ (pure solvent) ຫຼື ຕົວເຮັດລະລາຍທີ່ເຄື່ອນທີ່ (mobile phase), ປິດຂວດໃຫ້ແໜ້ນ, ແລະ ເກັບໄວ້ໃນສະພາບການທົ່ວໄປ ກ່ອນຈະນຳເອົາເນື້ອໃນໄປສົ່ງທົດສອບ ແລະ ວິເຄາະຜົນໄດ້ຮັບຈາກການທົດສອບດ້ວຍວິທີການຄຣອມາໂຕກຣາຟີ (chromatograms) ເພື່ອຊອກຫາສາຍສັນຍານທີ່ບໍ່ຄວນມີ (extraneous peaks) ທີ່ເກີນຈາກຂອບເຂດເນື້ອທີ່ທີ່ກຳນົດໄວ້. ການວັດແທກຄ່າ pH ຂອງນ້ຳ ຫຼື ບັຟເຟີທີ່ເກັບໄວ້ໃນຂວດເປັນເວລາທີ່ກຳນົດໄວ້ ຈະປະເມີນປະລິມານຂອງສານອັນເກີດຈາກການລ້າງອອກ (alkaline leaching) ຈາກພື້ນຜິວຂວດ, ໂດຍຂອບເຂດການຮັບຮອງ (acceptance limits) ຖືກກຳນົດຂຶ້ນຢູ່ກັບຄວາມໄວ້ອ່ອນ (sensitivity) ຂອງວິທີການຕໍ່ການປ່ຽນແປງຄ່າ pH. ການທົດສອບອັດຕາການຟື້ນຟູ (Recovery testing) ໂດຍໃຊ້ຕົວຢ່າງຄວບຄຸມຄຸນນະພາບ (quality control samples) ທີ່ຖືກເຕີມສານທີ່ຕ້ອງການ (spiked) ໃນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ຄຸມເອົາທັງໝົດຂອງຂອບເຂດວິທີການ (method range) ສະເໜີເອົາຫຼັກຖານທີ່ຊັດເຈນກ່ຽວກັບຄວາມເຂົ້າກັນໄດ້ຂອງວັດສະດຸ, ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວ ຂອບເຂດການຮັບຮອງຈະຕ້ອງການໃຫ້ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ວັດໄດ້ຢູ່ໃນຊ່ວງ 85 ເຖິງ 115 ເປີເຊັນ ຂອງຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ກຳນົດໄວ້ (nominal values).

ການທົດສອບຄວາມຖືກຕ້ອງຮ່ວມກັນ (Cross-Validation) ເມື່ອປ່ຽນແຫຼ່ງທີ່ມາຂອງວັດສະດຸ

ການປ່ຽນຜູ້ສະໜອງຂວດ HPLC ຫຼື ການເຄື່ອນຍ້າຍຈາກປະເພດວັດຖຸດິບໜຶ່ງໄປອີກປະເພດໜຶ່ງພາຍໃນວິທີການທີ່ໄດ້ຮັບການຢືນຢັນແລ້ວ ຕ້ອງມີການຢືນຢັນຂ້າມຢ່າງເປັນລະບົບເພື່ອສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າມີປະສິດທິຜົນທີ່ເທົ່າທຽມກັນ ແລະ ຮັກສາຄວາມສອດຄ່ອງຕາມຂໍ້ກຳນົດດ້ານການປະຕິບັດ. ການທົດສອບທຽບທີ່ເຮັດຄວນລວມເອົາທຸກໆປັດໄຈທີ່ໄດ້ກຳນົດໄວ້ໃນຂະນະທີ່ພັດທະນາວິທີການເດີມ ເຊັ່ນ: ຄວາມຖືກຕ້ອງ, ຄວາມຖືກຕ້ອງແລະຄວາມສອດຄ່ອງ, ຄວາມເຈາະຈົງ, ຊ່ວງຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ, ແລະ ຄວາມສະຖຽນ, ໂດຍເງື່ອນໄຂທີ່ຮັບໄດ້ຕ້ອງກຳນົດວ່າວັດຖຸດິບໃໝ່ຕ້ອງບັນລຸຫຼືເກີນກວ່າປະສິດທິຜົນທີ່ສະແດງໄດ້ດ້ວຍຂວດເດີມ. ການທົດສອບຄວາມເທົ່າທຽມກັນດ້ານສະຖິຕິ ໂດຍໃຊ້ຮູບແບບທີ່ເໝາະສົມເຊັ່ນ: ການທົດສອບແບບຂ້າມ (crossover studies) ທີ່ມີການປຽບທຽບຄູ່ (paired comparisons) ຈະໃຫ້ການປະເມີນທີ່ເຂັ້ມງວດກວ່າການກວດສອບເງື່ອນໄຂເທົ່ານັ້ນ, ເຊິ່ງສາມາດຈັບຈຸດແຕກຕ່າງທີ່ບໍ່ເດັ່ນຊັດເຊັ່ນ: ອັດຕາການດຶງວິເຄາະ (analyte recovery) ຫຼື ສຽງເບື້ອງລຸ່ມ (baseline noise) ທີ່ອາດຈະສົ່ງຜົນຕໍ່ຄວາມເຊື່ອຖືໄດ້ຂອງວິທີການ.

ຄວາມຕ້ອງການດ້ານເອກະສານສຳລັບການປ່ຽນແປງວັດຖຸແຕກຕ່າງກັນໄປຕາມເຂດອຳນາດທາງດ້ານການຄຸມຄວບຄຸມ ແລະ ປະເພດການນຳໃຊ້ ໂດຍວິທີການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບຢາມັກຈະຕ້ອງມີຂະບວນການຄວບຄຸມການປ່ຽນແປງຢ່າງເປັນທາງການ ລວມທັງການປະເມີນຄວາມສ່ຽງ ການອະນຸມັດໂປຼຕີຄອນການທົດສອບຄືນ ແລະ ການແຈ້ງຕໍ່ອຳນາດການຄຸມຄວບຄຸມ ຫຼື ການຍື່ນເອກະສານຕາມລະດັບຄວາມສຳຄັນຂອງການປ່ຽນແປງ. ວິທະຍາສາດຄວນຮັກສາບັນທຶກລະອຽດເກີ່ຍວກັບຂໍ້ກຳນົດຂອງຂວດ, ສາກົນຮັບຮອງຈາກຜູ້ຜະລິດ ແລະ ຂໍ້ມູນການຮັບຮອງຕາມລຸ້ນເພື່ອສະໜັບສະໜູນການກວດສອບຈາກອຳນາດການຄຸມຄວບຄຸມ ແລະ ເພື່ອຊ່ວຍໃຫ້ການສືບສາເຫດຕົ້ນຕໍເມື່ອເກີດຄວາມຜິດປົກກະຕິໃນການວິເຄາະ. ການສື່ສານລ່ວງໆກັບຜູ້ສະໜອງຂວດກ່ຽວກັບການປ່ຽນແປງຂະບວນການຜະລິດ ການປ່ຽນແປງວັດຖຸດິບ ຫຼື ການຍ້າຍສະຖານທີ່ຜະລິດ ສາມາດຊ່ວຍໃຫ້ວິທະຍາສາດຄາດເດົາໄດ້ເຖິງຜົນກະທົບທີ່ເປັນໄປໄດ້ຕໍ່ປະສິດທິພາບຂອງວັດຖຸ ແລະ ດຳເນີນການທົດສອບຄືນເພື່ອຮັບຮອງໃໝ່ຢ່າງເໝາະສົມກ່ອນທີ່ບັນຫາຈະເກີດຂຶ້ນໃນຂະບວນການທົດສອບການຜະລິດ.

ການກຳນົດເງື່ອນໄຂທີ່ເໝາະສົມສຳລັບການທົດສອບຄືນ ແລະ ອາຍຸການໃຊ້ງານ

ຄວາມສະຖຽນຂອງຕົວຢ່າງໃນຂວດ HPLC ກຳນົດເວລາທີ່ເໝາະສົມທີ່ຈະເກັບຮັກສາຕົວຢ່າງລະຫວ່າງການກະກຽມແລະການວິເຄາະ, ໂດຍປັດໄຈທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບວັດສະດຸລວມເຖິງອັດຕາການດູດຊຶມ, ການເກັບກູ້ຂອງສານທີ່ອາດຈະເກີດຂື້ນຈາກວັດສະດຸ, ແລະການເສື່ອມສลายທີ່ເກີດຈາກການເຮັດຕົວເປັນຕົວເຮັດປະຕິກິລິຍາ ເຊິ່ງກຳນົດຂອບເຂດທີ່ເປັນໄປໄດ້ຕໍ່ການລ່າຊ້າທີ່ຍອມຮັບໄດ້. ການສຶກສາຄວາມສະຖຽນຢ່າງເປັນທາງການທີ່ດຳເນີນໃນຂະນະການຮັບຮອງວິທີການ ກຳນົດເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາໃນສະພາບປົກກະຕິ (bench-top), ໃນຕູ້ເຢັນ, ແລະໃນຕູ້ເຢັນຈັດຈ່າຍ (frozen) ໂດຍທີ່ຕົວຢ່າງຈະຕ້ອງຮັກສາຄວາມຖືກຕ້ອງທີ່ຍອມຮັບໄດ້, ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວຕ້ອງຮັບປະກັນວ່າຄ່າຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ວັດແທກໄດ້ຈະຄົງຢູ່ໃນຊ່ວງ 85 ຫາ 115 ເປີເຊັນຂອງຄ່າເລີ່ມຕົ້ນໃນໄລຍະເວລາທີ່ກຳນົດໄວ້. ການສຶກສາເຫຼົ່ານີ້ຈະຕ້ອງໃຊ້ວັດສະດຸຂອງຂວດ ແລະລະບົບປິດຂວດທີ່ຈະນຳໃຊ້ຢ່າງເປັນປະຈຳ, ເນື່ອງຈາກສະຫຼຸບການສະຖຽນທີ່ໄດ້ຈາກການໃຊ້ວັດສະດຸປະເພດໜຶ່ງອາດຈະບໍ່ສາມາດນຳໄປໃຊ້ກັບການຈັດຕັ້ງທີ່ແຕກຕ່າງກັນໄດ້.

ການຕິດຕາມຄວາມສະຖຽນຂອງລະບົບໃນເວລາຈິງໃນระหว່າງການດຳເນີນງານປົກກະຕິ ສະຫນັບສະຫນູນການຢືນຢັນຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງວ່າ ຂອບເຂດການເກັບຮັກສາທີ່ໄດ້ກຳນົດໄວ້ຍັງຄົງເໝາະສົມ ເມື່ອຊຸດຂອງເຄມີພາບ (reagent lots), ການຈັດຕັ້ງຂອງເຄື່ອງມື (instrument configurations), ແລະ ສະພາບແວດລ້ອມ (environmental conditions) ມີການປ່ຽນແປງໄປຕາມວຟົງການຂອງວິທີການ (method lifecycle). ການວິເຄາະແນວໂນ້ມຂອງຜົນໄດ້ຮັບຈາກຕົວຢ່າງການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບ (quality control sample results) ທີ່ຖືກວິເຄາະໃນໄລຍະເວລາທີ່ແຕກຕ່າງກັນຫຼັງຈາກການເตรີຍມ ສາມາດເປີດເຜີຍການປ່ຽນແປງຂອງຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຢ່າງເປັນລະບົບ (systematic concentration drift) ທີ່ເກີດຈາກການປະຕິກິລິຍາລະຫວ່າງວັດຖຸ (material interactions), ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ສາມາດດຳເນີນການສືບສວນແລະດຳເນີນການປັບປຸງຢ່າງທັນທີກ່ອນທີ່ຜົນໄດ້ຮັບທີ່ບໍ່ຢູ່ໃນຂອບເຂດທີ່ກຳນົດ (out-of-specification results) ຈະສົ່ງຜົນຕໍ່ຂໍ້ມູນທີ່ສາມາດລາຍງານໄດ້. ຫ້ອງທົດລອງຄວນກຳນົດຂອບເຂດເຕືອນ (alert limits) ທີ່ເຂັ້ມງວດກວ່າເກນການຮັບຮອງ (acceptance criteria) ເພື່ອເປີດການສືບສວນເມື່ອແນວໂນ້ມຄວາມສະຖຽນເຂົ້າໃກ້ຮູບແບບທີ່ຄວນເປັນຫ່ວງ, ແລະ ດຳເນີນການຫຼຸດເວລາການເກັບຮັກສາ (tightened holding times) ຫຼື ເปลີ່ຍແປງວັດຖຸທີ່ໃຊ້ ເພື່ອຮັກສາຄວາມເຊື່ອຖືໄດ້ຂອງວິທີການ ແລະ ຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງຂໍ້ມູນໃນທັງໝົດຂອງວັฏຈັກການຢືນຢັນທີ່ຍາວນານ.

ຄຳຖາມທີ່ຖືກຖາມເລື້ອຍໆ

ຄວາມແຕກຕ່າງທີ່ສຳຄັນລະຫວ່າງແກ້ວປະເພດ I ແລະ ແກ້ວປະເພດ II ສຳລັບການນຳໃຊ້ໃນຂວດ HPLC ແມ່ນຫຍັງ?

ແກ້ວ borosilicate ປະເພດ I ມີຊີລິກາປະມານ 80 ເປີເຊັນ ແລະ ມີການເພີ່ມບໍຣອນ trioxide ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ມີຄວາມຕ້ານທານທາງເຄມີທີ່ດີເລີດ ແລະ ການລ້າງອາຍຸອ້ອນ (ion leaching) ໃນລະດັບຕ່ຳສຸດ ເຮັດໃຫ້ເປັນທາງເລືອກທີ່ເໝາະສົມທີ່ສຸດສຳລັບການນຳໃຊ້ໃນດ້ານຢາ ແລະ ການວິເຄາະຊີວະເຄມີ. ແກ້ວ soda-lime ປະເພດ II ມີຊີລິກາ້ນ້ອຍກວ່າ ແລະ ມີຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງອັກຊີໄດ້ຂອງ sodium ແລະ calcium ສູງກວ່າ ສົ່ງຜົນໃຫ້ມີການສະກັດເອົາສານອັນເກີດຈາກຄວາມເປັນດ່າງ (alkaline extractables) ໃນລະດັບທີ່ສູງຂຶ້ນ ແລະ ຄວາມໝັ້ນຄົງຫຼຸດລົງໃນສະພາບ pH ທີ່ຮຸນແຮງ. ມາດຕະຖານ USP ຈັດແບ່ງແກ້ວປະເພດ I ເປັນແກ້ວທີ່ເໝາະສົມສຳລັບການນຳໃຊ້ສ່ວນຫຼາຍໃນການເຮັດຢາທີ່ໃຫ້ທາງເສັ້ນເລືອດ (parenteral) ແລະ ຢາທີ່ໃຫ້ທາງການສູດ (injectable) ແຕ່ຈຳກັດການນຳໃຊ້ແກ້ວປະເພດ II ໃນເວລາທີ່ການລ້າງອາຍຸອ້ອນທີ່ເກີດຈາກຄວາມເປັນດ່າງບໍ່ໄດ້ສົ່ງຜົນເສຍຕໍ່ຄຸນນະພາບຂອງຜະລິດຕະພັນ. ສຳລັບການວິເຄາະດ້ວຍວິທີ chromatographic, ຂວດແກ້ວ borosilicate ປະເພດ I ສາມາດໃຫ້ອັດຕາການດຶງຊື້ງ (analyte recovery) ທີ່ດີຂຶ້ນ, ມີມື້ນ້ອຍລົງຈາກສິ່ງປົນເປືືອນພື້ນຖານ (background contamination), ແລະ ມີປະສິດທິຜົນທີ່ເໝືອນກັນຫຼາຍຂຶ້ນໃນຕົວຢ່າງທີ່ແຕກຕ່າງກັນຫຼາຍປະເພດ ເມື່ອທຽບກັບຂວດປະເພດ II.

ຂ້ອຍຈະຮູ້ໄດ້ແນວໃດວ່າມີການສູນເສຍເນື່ອງຈາກການດູດຊຶມ (adsorptive losses) ເກີດຂຶ້ນກັບວັດສະດຸຂວດ HPLC ທີ່ຂ້ອຍກຳລັງໃຊ້ຢູ່?

ດຳເນີນການສຶກສາການຟື້ນຕົວຕາມເວລາ ໂດຍການເຮັດຕົວຢ່າງຊ້ຳຄືນໃນລະດັບຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຕ່ຳ ກາງ ແລະ ສູງ ແລ້ວວິເຄາະຕົວຢ່າງທີ່ເອົາອອກມາທັນທີຫຼັງຈາກການເຮັດ ແລະ ໃນໄລຍະເວລາທີ່ເທົ່າກັບຂະບວນການເຮັດວຽກຈິງຂອງທ່ານ ເຊັ່ນ: ສີ່ຊົ່ວໂມງ ແລະ ສິບເອັດຊົ່ວໂມງ ແລະ ຢີ່ສິບສີ່ຊົ່ວໂມງ ການຫຼຸດລົງຢ່າງມີນັຍສຳຄັນທາງດ້ານສະຖິຕິຂອງຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ວັດໄດ້ຕາມເວລາ ບອກເຖິງການສູນເສຍຈາກການດູດຊືມ (adsorptive loss) ໂດຍເປັນພິເສດຖ້າຜົນດັ່ງກ່າວເກີດຂຶ້ນຢ່າງເດັ່ນຊັດໃນລະດັບຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຕ່ຳ ເປີຽບທຽບການຟື້ນຕົວລະຫວ່າງວັດຖຸທີ່ໃຊ້ເຮັດຂວດທີ່ແຕກຕ່າງກັນ ໂດຍການເຮັດຕົວຢ່າງທີ່ຄືກັນໃນຂວດທີ່ແຕກຕ່າງກັນ ແລ້ວວັດແທກຫຼັງຈາກໄລຍະເວລາການເກັບຮັກສາທີ່ເທົ່າກັນ ໂດຍຖ້າຄວາມແຕກຕ່າງຂອງການຟື້ນຕົວເກີນຫ້າເປີເຊັນ ຈະບອກເຖິງຄວາມບໍ່ເຂົ້າກັນໄດ້ຂອງວັດຖຸ ລວມເຖິງທັງວິທີແກ້ໄຂມາດຕະຖານທີ່ບໍ່ປົນເປື້ອນ (neat standard solutions) ແລະ ຕົວຢ່າງໃນເມດຕຣິກຊ໌ທາງຊີວະພາບ ຫຼື ສິ່ງແວດລ້ອມທີ່ກ່ຽວຂ້ອງ ເນື່ອງຈາກສ່ວນປະກອບຂອງເມດຕຣິກຊ໌ອາດຈະເຮັດໃຫ້ການດູດຊືມເກີດຂຶ້ນໄວຂຶ້ນ ຫຼື ປ້ອງກັນການດູດຊືມໄດ້ຜ່ານກົນໄກການຈັບຈູ່ທີ່ເຮັດໃຫ້ເກີດການແຂ່ງຂັນກັນທີ່ເທື້ອຜິວ.

ຂ້ອຍສາມາດນຳໃຊ້ຂວດ HPLC ອີກຄັ້ງຫຼັງຈາກໄດ້ທຳການລ້າງຢ່າງເໝາະສົມຫຼືບໍ?

ການນຳໃຊ້ຂວດ HPLC ອີກຄັ້ງແມ່ນເປັນໄປໄດ້ທາງດ້ານເຕັກນິກຫຼັງຈາກປະຕິບັດຂະບວນການລ້າງທີ່ໄດ້ຮັບການຢືນຢັນແລ້ວ ແຕ່ກໍ່ນຳມາເຖິງຄວາມສ່ຽງຕ່າງໆ ເຊັ່ນ: ການຂັບໄສ່ສານເຄື່ອງຕົວຢ່າງທີ່ຜ່ານມາອອກບໍ່ສົມບູນ, ການປົນເປື້ອນດ້ວຍສານລ້າງຫຼືຕົວຢາທີ່ໃຊ້ລ້າງ, ແລະ ຄວາມເສຍຫາຍທາງຮ່າງກາຍຕໍ່ພື້ນທີ່ປິດຜາກຈາກການຈັດການຊ້ຳໆ. ວິທະຍາສາດດ້ານຢາທີ່ດຳເນີນການຢູ່ໃຕ້ຂໍ້ບັງຄັບ GMP ມັກຈະຫ້າມການນຳໃຊ້ຂວດອີກຄັ້ງສຳລັບການທົດສອບເພື່ອປະລິມານເນື່ອງຈາກຄວາມກັງວົນເລື່ອງການປົນເປື້ອນຂ້າມ ແລະ ຂໍ້ກຳນົດດ້ານການຕິດຕາມທີ່ມາ. ສຳນັກວິຈັຍດ້ານວິຊາການ ແລະ ອຸດສາຫະກຳ ອາດຈະຈັດຕັ້ງໂປຣແກຣມການນຳໃຊ້ຂວດອີກຄັ້ງ ໂດຍປະກອບດ້ວຍການລ້າງດ້ວຍຕົວຢາຫຼາຍຊັ້ນ, ການລ້າງດ້ວຍສານລ້າງ, ການປິ່ນປົວດ້ວຍເປັກ, ແລະ ວຟີການເຜົາທີ່ອຸນຫະພູມສູງ, ແຕ່ການຢືນຢັນຈະຕ້ອງສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າຂວດທີ່ໄດ້ຮັບການລ້າງແລ້ວໃຫ້ຜົນໄດ້ຮັບທີ່ເທົ່າທຽບກັບຂວດໃໝ່ສຳລັບການນຳໃຊ້ທີ່ເປັນເລື່ອງເລີຍ. ການປິ່ນປົວພື້ນໜ້າ ເຊັ່ນ: ການປິ່ນປົວດ້ວຍ silanization ຈະເສື່ອມສະພາບລົງເມື່ອຖືກລ້າງຊ້ຳໆ ເຮັດໃຫ້ຕ້ອງປ່ຽນໃໝ່ເຖິງແມ່ນວ່າຄວາມເຂັ້ມແຂງທາງຮ່າງກາຍຈະຍັງຄົງຢູ່ໃນເກນທີ່ຍອມຮັບໄດ້. ການວິເຄາະດ້ານເສດຖະກິດຄວນພິຈາລະນາຕົ້ນທຶນແຮງງານສຳລັບການຢືນຢັນ ແລະ ການປະຕິບັດການລ້າງ ເທີບເທີບກັບຄ່າໃຊ້ຈ່າຍເພີ່ມເຕີມສຳລັບຂວດທີ່ໃຊ້ແລ້ວທິ້ງ, ເຊິ່ງມັກຈະເປີດເຜີຍວ່າການນຳໃຊ້ຂວດອີກຄັ້ງມີຂໍ້ດີດ້ານຕົ້ນທຶນທີ່ເລັກນ້ອຍຫຼາຍ.

ຂ້ອຍຕ້ອງການຂວດພິເສດສຳລັບການວິເຄາະສານອິນິນທີ່ມີຄວາມງ່າຍຕໍ່ການລະເຫີຍນຫຼືບໍ່?

ການວິເຄາະສານອິນີເລີ່ງອິນີເລີ່ງອິນີເລີ່ງ (Volatile organic compound) ຕ້ອງການການຈັດຕັ້ງຂອງຂວດ HPLC ທີ່ຫຼຸດຜ່ອນປະລິມານບ່ອນຫວ່າງໃນຂວດໃຫ້ໝາຍທີ່ສຸດ ແລະ ສະຫຼາບການປິດຢ່າງແໜ້ນຂອງຂວດເພື່ອປ້ອງກັນການສູນເສຍຈາກການລະເຫີຍນໃນໄລຍະເກັບຮັກສາ ແລະ ໃນໄລຍະທີ່ຕົວຢ່າງຢູ່ໃນອຸປະກອນເອົາຕົວຢ່າງອັດຕະໂນມັດ (autosampler). ຂວດປິດດ້ວຍຝາສະກູ້ວທີ່ມີ septa ທີ່ບຸກຄົນດ້ວຍ PTFE ມີຄວາມເໝາະສົມສຳລັບການປິດຢ່າງແໜ້ນສຳລັບສານທີ່ມີຄວາມລະເຫີຍນປານກາງ ເຊັ່ນ: ອັລກົຮອນ (alcohols), ເຄໂທນ (ketones), ແລະ ຫານໂຄບອຣັນອາໂຣມາຕິກ (aromatic hydrocarbons) ເມື່ອປະລິມານຕົວຢ່າງເຕັມໄປດ້ວຍຢ່າງໜ້ອຍ 80% ຂອງຄວາມຈຸຂອງຂວດ. ສຳລັບສານທີ່ມີຄວາມລະເຫີຍນສູງເຊັ່ນ: ຕົວເຮັດລະລາຍທີ່ມີໄຮໂລເຈັນ (halogenated solvents), ຫານໂຄບອຣັນທີ່ມີນ້ຳໜັກໂມເລກຸນຕ່ຳ (low-molecular-weight hydrocarbons), ແລະ ສານທີ່ຢູ່ໃນຮູບແບບກຳມະສານ (gaseous compounds) ອາດຈະຕ້ອງໃຊ້ຂວດປິດດ້ວຍການກົດ (crimp-top vials) ທີ່ມີ septa ຈາກຢາງບູໄທລ໌ (butyl rubber) ເຊິ່ງສ້າງສານການປິດຢ່າງແໜ້ນທີ່ຕ້ານການລະເຫີຍນຜ່ານ. ການເກັບຮັກສາຕົວຢ່າງໃນອຸປະກອນເອົາຕົວຢ່າງອັດຕະໂນມັດທີ່ຖືກເຢັນຈະຫຼຸດຜ່ອນຄວາມດັນຂອງໄອ (vapor pressure) ແລະ ຊ້າອັດຕາການລະເຫີຍນ, ແຕ່ການກົດຕົວຂອງນ້ຳ (condensation) ໃນພື້ນຜິວຂວດທີ່ເຢັນອາດຈະເຮັດໃຫ້ເກີດມືອນນ້ຳເປື້ອນເຂົ້າໄປໃນຕົວຢ່າງເມື່ອຂວດຖືກນຳກັບຄືນໄປສູ່ອຸນຫະພູມປົກກະຕິ. ການຢືນຢັນຄວາມສະຖຽນຂອງສານທີ່ມີຄວາມລະເຫີຍນຄວນປະກອບດ້ວຍການສົ່ງຕົວຢ່າງຊ້ຳຄືນຈາກຂວດດຽວກັນເປັນເວລາຕໍ່ເນື່ອງທີ່ເທົ່າກັບເວລາທີ່ໃຊ້ໃນການວິເຄາະທັງໝົດ (sequence duration) ເພື່ອກວດຫາການສູນເສຍທີ່ເກີດຂຶ້ນໃນໄລຍະການວິເຄາະ ແທນທີ່ຈະເກີດຂຶ້ນເພີງແຕ່ໃນໄລຍະການເກັບຮັກສາກ່ອນການວິເຄາະເທົ່ານັ້ນ.